Parámetros de retención

6.2.01 Volumen (tiempo) de retención de un compuesto no retenido (Vo , to)

Es el volumen de retención de un compuesto cuyas moléculas son mayores que los poros más grandes de las partículas del gel. Será pues el primer componente en eluirse. Su correspondiente tiempo de retención es to :

to = Vo / Fc

Si se desprecia cualquier volumen extra-columna, Vo será igual al volumen interparticula de la columna (ver 6.1.01)

6.2.02 Volumen (tiempo) de retención (VR , tR)

Es el volumen (tiempo) de un compuesto cuyas moléculas son más pequeñas que los poros más grandes de las partículas del gel, pero mayores que los poros más pequeños. El tiempo de retención correspondiente es tR :

tR = VR / Fc

6.2.03 Volumen (tiempo) de retención ajustado (V , t)

Es el volumen (tiempo) de retención menos el volumen de retención de un compuesto no retenido:

V = VR - Vo

El tiempo de retención correspondiente es t :

t = tR - to = V / Fc = ( VR - Vo ) / Fc

6.2.04 Volumen (tiempo) total de fase móvil (Vt , tt)

Es el volumen (tiempo) de retención de un compuesto cuyas moléculas son menores que los poros más pequeños de las partículas del gel. El tiempo de retención correspondiente es tt :

tt = Vt / Fc

6.2.05 Factor de retención (ke)

Es la relación entre el volumen (tiempo) de retención ajustado y el volumen (tiempo) de retención de un compuesto no retenido.

6_2_05.jpg

también se puede llamar factor de capacidad. Sin embargo, la expresión antes indicada define mejor su significado real (ver 3.7.12)

6.2.06 Constante de distribución en cromatografía de exclusión (Ko)

Es la fracción del volumen intrapartícula (volumen de los poros) accesible por difusión, a las moléculas de un determinado compuesto:

6_2_06.jpg

Para un compuesto no retenido VR = Vo , por lo que K = 0. Por otro lado, para un compuesto cuyas moléculas son menores que los poros más pequeños, VR = Vt por lo que Ko = 1. En otras palabras, el valor de Ko varía entre cero y la unidad. En cromatografía de exclusión, Ko está relacionado con el volumen de retención de un compuesto y los volúmenes inter e intrapartícula de la columna (Vo y Vi , respectivamente), de forma análoga a la cromatografía de líquidos en general (ver 3.9.01) :

VR = Vo + Ko Vi